威脅人類健康的“隱形殺手”——黃曲霉毒素

黃曲霉毒素（Aflatoxins）是一類由黃曲霉（Aspergillus flavus）、寄生曲霉（Aspergillus parasiticus）等產(chǎn)毒真菌產(chǎn)生的天然污染物，廣泛存在于農(nóng)產(chǎn)品及食品中，如花生、玉米、大米、堅果、棉籽和乳制品等。作為已知毒性最強的真菌毒素之一，黃曲霉毒素具有強致癌性、致畸性和致突變性，被世界衛(wèi)生組織（WHO）國際癌癥研究機構(gòu)（IARC）列為Ⅰ類致癌物。其分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，耐高溫（熔點200℃—300℃），常規(guī)烹調(diào)難以破壞，因此有效檢測和控制食品中的黃曲霉毒素含量對保障公共健康至關(guān)重要。

2025-07-18 15:17:45無錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司5

黃曲霉毒素的危害與污染現(xiàn)狀

黃曲霉毒素的主要衍生物包括B1、B2、G1、G2、M1、M2等，其中B1毒性最強，是氰化鉀的10倍、砒霜的68倍。動物實驗表明，黃曲霉毒素可引發(fā)肝細胞壞死、膽管增生，甚至肝癌；

人類長期攝入低劑量毒素會導(dǎo)致慢性中毒，表現(xiàn)為肝臟損傷、免疫抑制，并明顯增加肝癌風(fēng)險。歷史上，英國火雞X病、印度玉米中毒事件、肯尼亞玉米污染事件等均由黃曲霉毒素引發(fā)，

造成大量人畜傷亡。

黃曲霉毒素的污染貫穿農(nóng)產(chǎn)品種植、收獲、儲存、加工全鏈條。溫暖潮濕氣候（如熱帶、亞熱帶地區(qū)）更易滋生產(chǎn)毒菌株，而儲存不當(dāng)（如水分含量＞12%、通風(fēng)不良）會加速毒素合成。

據(jù)統(tǒng)計，全球每年因黃曲霉毒素污染導(dǎo)致的糧食損失達25%，對農(nóng)業(yè)經(jīng)濟和食品安全構(gòu)成嚴重威脅。

酶標(biāo)儀檢測黃曲霉毒素的原理與優(yōu)勢

酶標(biāo)儀（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Reader）是一種基于光吸收原理的高靈敏度檢測儀器，通過測量酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化來定量分析目標(biāo)物質(zhì)。在黃曲霉毒素檢測中，

酶標(biāo)儀結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）技術(shù)，具有以下優(yōu)勢：

1.高靈敏度：可檢測低至0.1 ng/mL的黃曲霉毒素，滿足食品安全標(biāo)準要求。

2.高通量：支持96孔板或384孔板檢測，單次可分析數(shù)十至數(shù)百個樣品。

3.操作簡便：無需復(fù)雜前處理，檢測周期短（通常2—4小時），適合現(xiàn)場快速篩查。

4.成本低：相比液相色譜（HPLC）或質(zhì)譜（MS），設(shè)備及試劑成本降低。

酶標(biāo)儀檢測黃曲霉毒素的步驟

1. 樣品準備

提?。悍Q取10—20 g含油食品（如花生、玉米）或液體樣品（如牛奶），加入甲醇-水（7:3）混合溶劑，振蕩提取30分鐘，離心后取上清液。稀釋：根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果，用磷酸鹽緩沖液（PBS）將提取液稀釋至毒素濃度在標(biāo)準曲線范圍內(nèi)（通常0—100 ng/mL）。

2. 試劑準備

使用黃曲霉毒素ELISA檢測試劑盒，包含以下關(guān)鍵組分：包被抗原的微孔板：固定有黃曲霉毒素B1、G1等特異性抗原。

標(biāo)準品：含0、5、10、20、50、100 ng/mL等濃度梯度的毒素溶液。

酶標(biāo)記抗體：辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的抗黃曲霉毒素單克隆抗體。

底物溶液：如四甲基聯(lián)苯胺（TMB），在酶催化下生成藍色產(chǎn)物。

終止液：2 M硫酸，用于終止反應(yīng)并穩(wěn)定顏色。

3. 加樣與溫育

標(biāo)準曲線繪制：向微孔板中加入100 μL不同濃度的標(biāo)準品，每個濃度設(shè)2—3個平行孔。

樣品檢測：加入100 μL稀釋后的樣品溶液，同時設(shè)置空白對照（提取溶劑）和陰性對照（已知無毒素樣品）。

競爭反應(yīng)：將微孔板置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘，使樣品中的毒素與包被抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)記抗體。

4. 洗滌與顯色

洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液（如PBS-Tween 20）沖洗3—5次，去除未結(jié)合物質(zhì)。